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人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

本章簡述人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書,由于文章信息較大,所以在此對說明書進行分樣發(fā)布,需要詳細人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書的可以致電原鑫生物科技獲取或直接到官方網(wǎng)站進行下載。承接人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(一)的部分,本篇具體說明人白細胞介素6ELISA試劑盒需要自備的實驗材料、樣本手機和儲存、試劑盒的準備以及檢測步驟,供各位科研人員進行參考。

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

一.首先看看人白細胞介素6elisa試劑盒組成以及存儲的知識

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

二. 再來看看人白細胞介素6ELISA試劑盒需要實驗用的器材

1. 酶標儀

2. 高精度移液器及一次性吸頭:0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl

3. 洗板機

4. 37℃孵育箱

5. 超純水,去離子水

6. 一次性稀釋用聚丙烯試管


三.樣本收集及儲存

1. 細胞培養(yǎng)上清: 將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并 于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

2. 血清樣本: 室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。

3. 血漿樣本: 將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混 合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。

4. 

需要注意的是:血清血漿樣本避免使用溶血、高血脂樣本,以免影響檢測結(jié)果;如果樣本中的靶標物檢測濃度高 于標準品的最高值,請將樣品做適當倍數(shù)稀釋后檢測,建議正式實驗前做預實驗以確定稀釋倍數(shù)。


四.人白細胞介素6ELISA試劑盒的準備工作

人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)

1. 試劑回溫:首先在實驗前 30 min 將試劑盒,待測樣本放置于室溫下復溫。

2. 配制洗滌液:預先計算好稀釋后的洗滌液使用體積,然后用超純水或去離子水將 20 倍濃縮洗滌液稀釋 成 1 倍應用液,未用完的濃縮洗滌液放入 4℃冰箱保存。

3. 標準品梯度稀釋:在標準品中加入1ml標準品稀釋液至完全溶解,按照濃度為350pg/ml、175pg/ml、87.5pg/ml、43.75pg/ml、21.88pg/ml、10.94pg/ml、5.47pg/ml進行等比稀釋,具體操作如下圖所示。


五.人白細胞介素6ELISA試劑盒檢測步驟

1 按照實驗設計,在標準品與樣本孔中加樣100ul,空白對照不加    

2 25℃避光孵育2h      

3 棄去液體,用洗滌液清洗4次,每次每孔至少加洗滌液300ul,洗完后吸水紙上拍干

4 加入酶標抗體溶液100ul,空白對照不加,25℃避光孵育1h      

5 同步驟3      

6 每孔加入底物A、B各50ul,25℃避光孵育20min,顯色淺可適當延長孵育時間

7 加入終止液50ul,10min內(nèi)在450nm波長處測OD值


以上就是人白細胞介素6ELISA試劑盒說明書(二)的相關理論和知識,下一篇上海原鑫生物科技有限公司將繼續(xù)分享人白細胞介素6ELISA試劑盒其他的說明。

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