苯丙氨酸解氨酶(PAL)代測(cè)檢測(cè)服務(wù) 
1.測(cè)定原理 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase，PAL)催化苯丙氨酸的脫氨反應(yīng)，使NH3釋放出來形成反式肉桂酸。此酶的在植物體內(nèi)次生物質(zhì)(如木質(zhì)素等)代謝中起重要作用。根據(jù)其產(chǎn)物，反式肉桂酸在290nm處吸光度的變化可以測(cè)定該酶的活性。 2.儀器設(shè)備 （1）紫外分光光度計(jì)（2）高速冷凍離心機(jī) （3）研缽（4）移液管：0.5mL1支，1mL3支，2mL1支，5mL1支 （5）試管:10mL5支（6）恒溫水浴 3.試劑 （1）0.1mol·L-1硼酸緩沖液，pH8.8。 （2）0.02mol·L-1L-苯丙氨酸（用pH8.8硼酸緩沖液配制）。 （3）提取介質(zhì)：內(nèi)含0.05mol·L-1硼酸緩沖液、5.0mmol·L-1巰基乙醇、1.0mmol·L-1EDTA-Na2、5%甘油pH8.3；5%PVP（聚乙烯吡咯烷酮）。 （4）6mol·L-1HCl。 4.材料 正常生長(zhǎng)或經(jīng)誘導(dǎo)處理的水稻、小麥葉片（或黃化幼苗）、馬鈴薯塊莖等植物新鮮組織。 5.方法步驟 （1）PAL的提取：取待測(cè)植物樣品1-2g，-15冷凍固定后于研缽中加少量的提取介質(zhì)、少量石英砂，冰浴研磨勻漿，最后用提取介質(zhì)定容到10mL，攪拌均勻，4層紗布過濾，濾液在4下10000r/min離心15min，上清液即為待測(cè)酶液，4保存?zhèn)溆谩?/span> （2）PAL酶活性測(cè)定：取4支10mL試管（3支測(cè)定管，1支對(duì)照管），分別加入0.02mol·L-1L-苯丙氨酸1.0mL（對(duì)照管不加，代之為蒸餾水），硼酸緩沖液(pH8.8)2.0mL,酶液1.0mL（根據(jù)酶活性適當(dāng)稀釋或增加體積），總體積4.0mL。搖勻后置30恒溫水浴保溫60min，加0.2mL6mol·L-1HCl終止反應(yīng)，若有沉淀需過濾或離心。用對(duì)照管調(diào)零，在290nm處檢測(cè)測(cè)定管反應(yīng)液的吸光度A290. （3）以測(cè)定管反應(yīng)液每小時(shí)A290增加0.01為一個(gè)酶活性單位（U）： 式中，Vt：酶液總體積（mL）；FW：樣品鮮重（g）；Vs：測(cè)定時(shí)取酶液的量（mL）;v：反應(yīng)液總體積（mL）；t：反應(yīng)時(shí)間（h）
上海原鑫品牌優(yōu)勢(shì)
1、產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：產(chǎn)品具有高特異性、回收率高、線性好、變異系數(shù)低、穩(wěn)定性好； 2、質(zhì)量保證：產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，每批次產(chǎn)品必須通過QA、QC檢測(cè)才可出庫(kù)； 3、實(shí)力強(qiáng)大：ISO9001:2015認(rèn)證，標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室、研發(fā)中心，動(dòng)物房，高新技術(shù)企業(yè)； 4、技術(shù)支持：技術(shù)部5*8小時(shí)技術(shù)問題及時(shí)解答； 5、服務(wù)周到：發(fā)貨及時(shí)，三個(gè)工作日順豐快遞；售后無憂，包退包換。 研發(fā)、生產(chǎn)科研產(chǎn)品： ELISA試劑盒：多種屬、1000多種指標(biāo)：人、大小鼠、通用、牛、兔、山羊、倉(cāng)鼠、豬、馬、雞、犬、豚鼠、猴、綿羊 抗體：兔多抗、鼠單抗種類豐富，一抗1萬余種，二抗100多種； 重組蛋白：多項(xiàng)發(fā)明專利，原核表達(dá)系統(tǒng)穩(wěn)定表達(dá)蛋白1000余種。 ------------------------------------------ 在線聯(lián)系：17621047120（周經(jīng)理） QQ：2441609688（任經(jīng)理） 官方電話：400-788-2680 更多生化生理代測(cè)檢測(cè)服務(wù)：http://zhuluxx.com/daice-34-151-1.html |
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