脂肪酸類 - 甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒說明書 Triglyceride (TG) Content Assay kit 一、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品描述 甘油三酯(TG)是由長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子,不僅是細(xì)胞膜的主要成分,也是重要的
呼吸底物和供能物質(zhì),在脂肪酸運(yùn)輸過程中具有重要作用。血清中內(nèi)源性三酰甘油主要以 VLDL 的
形式運(yùn)輸,外源性三酰甘油主要以 CM 的形式運(yùn)輸,甘油三酯含量的增高與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾
病密切相關(guān)。
甘油三酯經(jīng) KOH 皂化水解生成甘油及脂肪酸,過碘酸氧化甘油生成甲醛,在銨離子存在下甲醛
能夠與乙酰丙酮縮合生成黃色物質(zhì),產(chǎn)物在 420 nm 處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量
檢測甘油三酯的含量。
二、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品內(nèi)容 
三、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒產(chǎn)品使用說明 測定過程中所需要的儀器和試劑:可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96 孔板、研缽/勻漿
器、可調(diào)式移液器、臺(tái)式離心機(jī)、恒溫水浴、正庚烷、異丙醇和蒸餾水。 甘油三酯(TG)的提?。筛鶕?jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果適當(dāng)調(diào)整樣本量及比例) ①細(xì)菌或細(xì)胞:離心收集細(xì)菌或細(xì)胞至離心管內(nèi),按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個(gè)):試劑一體積(mL)
為(500-1000):1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴超聲破碎(功
率 20%或 200 W,超聲 2 s,間隔 1 s,總時(shí)間 1 min),4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。 ②組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:(5-10)的比例(建議稱取 0.1 g 組織,加
入 1 mL 試劑一)處理樣品,冰浴勻漿,4℃ 8000 g 離心 10 min,取上清待測。 ③血清(漿)、培養(yǎng)液等液體樣本:直接測定或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定。 測定步驟
①分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min 以上,調(diào)節(jié)波長至 420 nm,蒸餾水調(diào)零。 ②在離心管中依次加入下列試劑:  注:加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時(shí)間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時(shí)間均應(yīng)保持一致; 吸光值測定:取 200 μL 反應(yīng)液至微量玻璃比色皿或 96 孔板中,測定 420 nm 處吸光值,記為 A
測定,A 標(biāo)準(zhǔn)和 A 空白;計(jì)算?A 測定=A 測定-A 空白,?A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)-A 空白。注:空白管只需測
定 1-2 次。 3.甘油三酯(TG)含量計(jì)算 
四、甘油三酯(TG)含量檢測試劑盒注意事項(xiàng) ①為確保試驗(yàn)重復(fù)性,加入試劑二后需劇烈震蕩,振蕩幅度、時(shí)間、反復(fù)次數(shù)以及等待分層時(shí)間
均應(yīng)保持一致,檢測體系中 65℃水浴后冷卻時(shí)間應(yīng)保持一致; ②若測定吸光值超出標(biāo)準(zhǔn)吸光值線性范圍:高于最高值將樣品使用試劑一適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,
低于最低值建議適當(dāng)增加樣本量后再進(jìn)行測定,計(jì)算時(shí)相應(yīng)修改; ③檢測過程中使用具有易揮發(fā)性物質(zhì),建議在通風(fēng)櫥中進(jìn)行測定,并做好防護(hù)措施; ④為保證結(jié)果準(zhǔn)確且避免試劑損失,測定前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書(以實(shí)際收到說明書內(nèi)容為準(zhǔn)),
確認(rèn)試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備是否充分,操作步驟是否清楚,且務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本進(jìn)行預(yù)測定,
過程中問題請(qǐng)您及時(shí)與工作人員聯(lián)系。
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