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檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應(yīng)用
檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應(yīng)用
品牌:原鑫生物
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  預(yù)約待測

檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應(yīng)用

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檸檬酸的物理性質(zhì):

在室溫下,檸檬酸為無色半透明晶體或白色顆?;虬咨Y(jié)晶性粉末,無臭、味極酸,有澀味,有微弱腐蝕性,潮解性強(qiáng),并伴有結(jié)晶水化合物生成,在潮濕的空氣中微有潮解性。它可以以無水合物或者一水合物的形式存在:檸檬酸從熱水中結(jié)晶時,生成無水合物;在冷水中結(jié)晶則生成一水合物。加熱到78 ℃時一水合物會分解得到無水合物。在15攝氏度時,檸檬酸也可在無水乙醇中溶解。檸檬酸結(jié)晶形態(tài)因結(jié)晶條件不同而不同,有無水檸檬酸C6H8O7也有含結(jié)晶水的檸檬酸2C6H8O7.H2O、C6H8O7.H2O或C6H8O7.2H?O。


檸檬酸檢測的化學(xué)性質(zhì):從結(jié)構(gòu)上講檸檬酸是一種三羧酸類化合物,并因此而與其他羧酸有相似的物理和化學(xué)性質(zhì)。加熱至175 ℃時它會分解產(chǎn)生二氧化碳和水,剩余一些白色晶體。檸檬酸是一種較強(qiáng)的有機(jī)酸,有3個H+可以電離; 加熱可以分解成多種產(chǎn)物,與酸、堿、甘油等發(fā)生反應(yīng)。

檸檬酸的檢測原理:檸檬酸在酸性緩沖液中,利用反相鍵合色譜法將其從樣品基質(zhì)中分離出來,根據(jù)該類物質(zhì)在紫外波長下的吸收進(jìn)行定性和定量分析。


檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應(yīng)用圖2

實(shí)驗的試劑:

1)溶劑:水,過濾后的二次蒸餾水

2)流動相:0.5%的H3PO4/KH2PO4緩沖液,PH=2.81, 含2.5%乙腈

3)檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)品;純度99.2%和99.5% 

4)檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)溶液分別準(zhǔn)確稱取蘋果酸、檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)品0.2g 和0.02g ,精確至0.0001g,用過濾后的二次蒸餾水將標(biāo)準(zhǔn)品溶解,轉(zhuǎn)移、定容于50ml容量瓶中,混勻后貼標(biāo)簽備用。

5)檸檬酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別將上述標(biāo)準(zhǔn)品貯備液以5倍和10倍比例稀釋,得到三個不同濃度的系列,在給定的色譜條件下,每一濃度樣品進(jìn)樣三次,然后繪制出標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)避光,在0~4℃下貯存,標(biāo)準(zhǔn)液貯存期不超過二個月。

儀器所使用的玻璃儀器必須是潔凈的。實(shí)驗過程中需要使用的儀器:液相色譜,單元泵,可變波長檢測器,化學(xué)工作站 ,色譜柱,進(jìn)樣器,需要的色譜條件:流動相:0緩沖液(PH=2.81);含乙腈。流量: 柱溫:40℃檢測進(jìn)樣量:


檸檬酸檢測在高效液相色譜中的應(yīng)用圖3

關(guān)于檸檬酸的實(shí)驗測定步驟:

1。樣品溶液的制備稱取濃縮果汁4.0~5.0g 或清汁10ml,精確至0.01g,用二次蒸餾水將其溶于50ML 容量瓶中,定容至刻度,混勻后,用0.45um濾膜的過濾器將其過濾至樣品瓶中,貼上標(biāo)簽備用。

2。測定:在以上色譜條件下,運(yùn)行儀器和測試方法,待基線穩(wěn)定后,按照標(biāo)準(zhǔn)溶液、樣品的順序進(jìn)樣。

3。計算根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)液繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行外標(biāo)法定量,保留時間和響應(yīng)因子均由標(biāo)準(zhǔn)液確定。

關(guān)于檸檬酸保存方法和儲存條件:

檸檬酸產(chǎn)品用內(nèi)襯食品用聚乙烯袋及雙層牛皮紙

應(yīng)注意防雨、防潮、防曬、不得與有毒、異味、有色粉未或腐蝕性物質(zhì)混裝、混運(yùn)。

本品應(yīng)貯存于陰涼、干燥庫房中不宜露天堆放。



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